FLUOROCULT LMX BROTH P/COLIFORMES TOTAIS E E.COLI 500G. MERCK

FLUOROCULT LMX BROTH P/COLIFORMES TOTAIS E E.COLI 500G       

Caldo Fluorocult LMX Enriquecimento para a detecção simultânea de coliformes totais e E.coli em água, alimentos e produtos lácteos pelo procedimento fluorogênico.

APROVADO PELO EPA.
Atende a metodologia por NMP (número mais provável), consequentemente a técnica por tubos múltiplos
Modo de ação:
O Caldo LMX foi descrito primeiro por MANAFI e KNEIFEL (1989) e modificado por MANAFI e OSSMER (1993) para melhorar o substrato de utilização, aumentar a sensibilidade e, ao mesmo tempo reduzir o tempo global de incubação em 24 horas. O Caldo Fluorocult ® LMX Modificado contém tampão de fosfato garantir uma elevada taxa de crescimento de coliformes totais. Lauril sulfato para inibir a flora Gram-positiva acompanhante. Por adicição do substrato cromogênico 5-bromo-4-Cloro-3-indolylß - D-galactopyranoside, que é clivada por coliformes e o substrato fluorogênico 4-methylumbelliferyl-ß-D-glucuronido, que é altamente específico para a E.coli, a detecção simultânea de coliformes totais e E.coli é possível. A mudança da cor do caldo de amarelo para azul-verde indica a presença de coliformes. Além disso, uma fluorescência azul sob luz UV permite a rápida detecção de E. coli. Como o triptofano é adicionado ao caldo, a reação de indol é feito através da adição de reagente de Kocavs facilmente . A formação de um círculo vermelho também confirma a
presença de E. coli. A enzima síntese é amplificado por 1-isopropil - ß-D-1-thio-galactopyranoside e aumenta a atividade da ß-Dgalactosidase.

Composição típica (g/litro):
Triptose 5.0;
Sódio cloreto 5.0;
Sorbitol 1.0;
Triptofano 1.0;
Di-potássio hidrogeno fosfato 2.7;
Potássio di-hidrogeno fosfato 2.0;
Lauril sulfato de sódio sal 0.1;
5-bromo-4-cloro-3-indolil-ß-D-galactopiranoside (X-GAL) 0.08;
4-methilumbelliferil-ß-D-glucuronide (MUG) 0.05;
1-isopropil-ß-D-1-tio-galactopiranoside (IPTG) 0.1.

Preparação:
Alimentos
Suspender 17g em 1 litro de água purificada. Aquecer a fervura até completa dissolução. Encher com 20ml os tubos. Autoclavar por 15min a 121°C.
Águas
Se 100ml de amostra forem testados, suspender 34g em 1 litro de água purificada. Aquecer a fervura até completa dissolução. Transferir 100ml para frascos de 250ml de capacidade. Autoclavar por 15min a 121°C.
pH: 6.8 ± 0.2 a 25 °C.
O caldo preparado é claro e amarelo.

Procedimento experimental e de avaliação:
Aplicação varia de acordo com o método / ou amostras utilizadas para teste de água ou alimento.
Incubação: até 24 horas a 35 ° C a 37 ° C. Se incubadas a temperatura ambiente (+20 a +25 ° C) a incubação prazo é prorrogado à 48 horas.

Interpretação dos resultados:
Coliformes totais: caldo mudou para cor azul-esverdeado.
E.coli: caldo azul-esverdeado e azul fluorescente utilizando lâmpada UV (366 nm). Adição de reagente de Kovacs formando anel vermelho na parte superior do tubo indica confimação adicional de E. Coli.

Imagem meramente ilustrativa.